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细胞生物学实验指导

细胞生物学实验指导

细胞生物学是一门实验性学科,在整个细胞生物学教学中占有重要地位,分为小实验和大实验。细胞生物学小实验与细胞生物学课堂教学在同一学期进行,主要是为配合细胞生物学课堂内容的学习而向全院各专业学生开设的公共实验课。由于学生人数多、教学时间短,(每次3小时,上12 周),细胞生物学小实验仍以观察、认识细胞结构和各种细胞器以及熟悉实验仪器为主,同时尽可能地让学生动手操作,其目的主要是印证课堂讲授的基础知识,使学生掌握该课程的基本理论、基本知识和基本技能。细胞生物学大实验是一门独立记学分的实验性课程,由于课时相对较多(每次6学时,共18周,每个实验1-4周,有时几个实验同时进行),要求学生查阅有关资料、能够独立设计实验、选择实验材料、制定实验方案、在教师指导下完成实验结果,分析与总结实验结果。其主要目的是在小实验的基础上进一步培养学生的科研素质、独立动手能力、创新能力及综合分析问题和解决问题的能力。

细胞生物学实验教材选用的是由我校杨汉民教授主编、高等教育出版社出版的《细胞生物学实验》。下面是我们目前开设的细胞生物学实验内容,为了方便起见,大小实验内容放在了一起。

实验一 普通光学显微镜及其使用

实验目的

了解普通光学显微镜的构造及其原理,并熟练掌握其操作方法。

实验用品

普通复式光学显微镜、载玻片、盖玻片、香柏油、生物制片标本、滤纸、擦镜纸。 实验原理和方法

普通光学显微镜从构造上可分光学、机械和电子三大系统。现重点阐述其光学系统及显微镜的操作技术。

一、显微镜的光学系统

光学系统通常由物镜、目镜、聚光器和光阑组成。

(一)物镜(objective)

显微镜的质量主要取决于物镜。物镜种类繁多,性能相差悬殊,制造厂家不一。同类物镜因工艺水平的高低,性能迥异。

1、物镜的种类

根据像差的校正程度,物镜可分为下列数种:

(1)消色物镜(achromatic objective)

消色差物镜,制造容易,是最常见的物镜,金属外壳上不刻代表标志。该物镜光谱中红光和蓝光聚焦于一点,黄绿光则聚焦于另一点,并纠正了黄绿光的球差。其最佳清晰范围是510~630nm之间。

(2)复消色差物镜(apochromatic objective)

消色差物镜是用特殊的光学玻璃制成,纠正了可见光的红、绿、蓝三种光的色差,使之聚焦于一点,质量优良。最佳清晰范围是400~720nm,容纳了全部可见光谱。残留有像场弯曲,使平面物体形成类似球形弯曲面的影像。结果使视野中心和边缘的曩像不能同时准焦。复消色差物镜的金属外壳,刻有“APO”字样,供作识别。

(3)萤石物镜(fluorite objective)

亦称半复消色差物镜(semi-apochromatic objective)。构成物镜的光学透镜,全部或大部分由萤石透镜取代,故名萤石物镜,色差校正介于消色差物镜与复消色差物镜之间,故又可称半复消色差物镜,最佳清晰范围在波长430~680nm的光谱区,包括了绝大部分的可见光谱,物镜的金属外壳,刻有“FL”字样(图1-1左)。

上述三种物质都残留程度不同的场曲,使得视场内不同部分的影像,不能同时准焦,镜检时,尽管可采用分区聚焦、渐次观察的方法,可是显微摄影却无法把分散于全视场的样品清晰地摄入一帧图片之中。

(4)平场物镜(Plan objective)

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